一、细胞背景
A20细胞是一种小鼠B细胞淋巴瘤细胞系，来源于BALB/c小鼠。该细胞系具有B细胞特征，表达表面免疫球蛋白（IgM），常用于研究B细胞淋巴瘤的发病机制、免疫治疗（如单克隆抗体疗法）以及药物筛选。A20细胞在免疫学、肿瘤学和药物开发领域具有重要的应用价值。
二、细胞复苏、传代和冻存方法
1. 常温细胞的复苏
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从液氮中取出冻存的A20细胞，迅速放入37°C水浴中解冻。
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将细胞悬液转移至15 mL离心管中，加入5 mL预热的完全培养基（RPMI 1640 + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin）。
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轻轻混匀，1000 rpm离心5分钟，弃上清。
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用新鲜培养基重悬细胞，转移至T25培养瓶中，置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。
2. 细胞传代
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当细胞密度达到1×10⁶ cells/mL时进行传代。
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将细胞悬液转移至离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃上清。
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用新鲜培养基重悬细胞，按1:3至1:5的比例分装至新的培养瓶中。
3. 细胞冻存
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收集对数生长期的细胞，1000 rpm离心5分钟，弃上清。
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用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬细胞，调整细胞密度至5×10⁶ cells/mL。
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分装至冻存管中，逐步降温至-80°C，24小时后转移至液氮中长期保存。
三、细胞鉴定
为确保细胞系的正确性，需进行以下鉴定：
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形态学鉴定：
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A20细胞呈圆形或椭圆形，悬浮生长，细胞大小均匀。
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流式细胞术：
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检测B细胞标志物（如CD19、CD20、IgM）的表达。
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STR profiling：
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通过短串联重复序列（STR）分析，确认细胞系的特异性。
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功能鉴定：
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通过体内外实验验证细胞的成瘤性和免疫原性。
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四、注意事项
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培养基：
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使用RPMI 1640培养基，添加10% FBS和1% Penicillin-Streptomycin。
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培养基需定期更换，避免营养耗尽。
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细胞密度：
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保持细胞密度在5×10⁵至2×10⁶ cells/mL之间，避免过度密集或稀疏。
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无菌操作：
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所有操作需在无菌条件下进行，定期检测细胞是否有污染。
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细胞状态监测：
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定期观察细胞形态和生长状态，若发现异常（如细胞聚集、生长缓慢等），及时排查原因。
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五、售后服务
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细胞质量问题：在收到细胞后1个月内，若发现细胞存在污染、死亡或其他质量问题，可联系技术支持，我们将免费重新发送一次细胞。
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技术支持：提供细胞培养、实验设计及结果分析的技术支持。
六、参考文献
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可根据具体实验需求，提供相关文献支持。
以上为A20小鼠B细胞淋巴瘤细胞的培养说明书，供实验室参考使用。如有任何疑问，请及时联系技术支持或相关专家。
