一、细胞背景
38C13细胞是一种小鼠B淋巴瘤细胞系,起源于C3H/HeN小鼠。该细胞系具有B细胞特征,表达表面免疫球蛋白(IgM),常用于研究B细胞淋巴瘤的发病机制、免疫治疗(如单克隆抗体疗法)以及药物筛选。38C13细胞在免疫学、肿瘤学和药物开发领域具有重要的应用价值。
二、研究意义和方向
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B细胞淋巴瘤研究:
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研究B细胞淋巴瘤的发病机制和信号通路。
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探索肿瘤微环境对B细胞淋巴瘤的影响。
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免疫治疗研究:
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开发针对B细胞淋巴瘤的单克隆抗体、CAR-T细胞疗法等免疫治疗策略。
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研究肿瘤抗原的表达及其在免疫逃逸中的作用。
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药物筛选:
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用于筛选抗肿瘤药物,评估药物的疗效和毒性。
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研究化疗药物对B细胞淋巴瘤的作用机制。
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肿瘤疫苗研究:
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作为肿瘤模型,用于开发肿瘤疫苗和免疫佐剂。
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三、实验方法步骤
1. 细胞复苏
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从液氮中取出冻存的38C13细胞,迅速放入37°C水浴中解冻。
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将细胞悬液转移至15 mL离心管中,加入5 mL预热的完全培养基(RPMI 1640 + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin)。
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轻轻混匀,1000 rpm离心5分钟,弃上清。
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用新鲜培养基重悬细胞,转移至T25培养瓶中,置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。
2. 细胞传代
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当细胞密度达到1×10⁶ cells/mL时进行传代。
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将细胞悬液转移至离心管中,1000 rpm离心5分钟,弃上清。
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用新鲜培养基重悬细胞,按1:3至1:5的比例分装至新的培养瓶中。
3. 细胞冻存
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收集对数生长期的细胞,1000 rpm离心5分钟,弃上清。
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用冻存液(90% FBS + 10% DMSO)重悬细胞,调整细胞密度至5×10⁶ cells/mL。
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分装至冻存管中,逐步降温至-80°C,24小时后转移至液氮中长期保存。
四、细胞鉴定
为确保细胞系的正确性,需进行以下鉴定:
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形态学鉴定:
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38C13细胞呈圆形或椭圆形,悬浮生长,细胞大小均匀。
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流式细胞术:
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检测B细胞标志物(如CD19、CD20、IgM)的表达。
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STR profiling:
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通过短串联重复序列(STR)分析,确认细胞系的特异性。
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功能鉴定:
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通过体内外实验验证细胞的成瘤性和免疫原性。
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五、注意事项
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培养基:
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使用RPMI 1640培养基,添加10% FBS和1% Penicillin-Streptomycin。
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培养基需定期更换,避免营养耗尽。
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细胞密度:
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保持细胞密度在5×10⁵至2×10⁶ cells/mL之间,避免过度密集或稀疏。
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无菌操作:
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所有操作需在无菌条件下进行,定期检测细胞是否有污染。
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细胞状态监测:
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定期观察细胞形态和生长状态,若发现异常(如细胞聚集、生长缓慢等),及时排查原因。
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六、售后服务
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细胞质量问题:在收到细胞后1个月内,若发现细胞存在污染、死亡或其他质量问题,可联系技术支持,我们将免费重新发送一次细胞。
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技术支持:提供细胞培养、实验设计及结果分析的技术支持。
七、参考文献
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可根据具体实验需求,提供相关文献支持。
以上为38C13小鼠B淋巴瘤细胞的培养说明书,供实验室参考使用。如有任何疑问,请及时联系技术支持或相关专家。