本试剂盒可用于检测食品或其他材料中是否有食用淀粉植物源性成分。现代食品加 工工艺极大改变了食材原有的味道、气味、色泽、纹理和质地等特性，因此传统的感官 鉴别技术已经无法对食材的真伪进行准确的鉴定。同时部分食材还有致敏性，因此基于 基因检测的快速灵敏的食材来源检测技术将对食品监管和安全提供重要的保障。本产品 是根据探针法荧光定量 PCR 原理开发的食用淀粉植物源性成分检测试剂盒，它具有下列 特点：

1.   即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。

2.   引物等组分经过优化，灵敏度高。

3.   提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4.   特异性高，引物是根据食用淀粉植物源性成分 DNA 序列高度保守区设计，不会 跟其他生物样本的 DNA 发生交叉反应。

5.   既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5 个数 量级。

6.   本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 PCR 反应。

7.   本产品只能用于科研。

成分规格

保存条件

低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。

使用方法

一、DNA 提取(样本制备区)

1.  （选做）如果有 N 个样品待提取，最好设置 N+2 个提取，多出的是 PC（样品制 备阳性对照）和 NC（样品制备阴性对照）。可以取阳性对照的 1000 倍稀释液 10μL 再加 上一定量的水，使总体积与待提取样品的规定体积一致，以此作为 PC 。另外用水作为  NC。

2.  用自选方法提取纯化样品 DNA ，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品(样本制备区)

（由于阳性对照浓度高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，避免污染样 品或本试剂盒的其他成分）。

1.    标记 6 个离心管，分别为 7 ，6 ，5 ，4 ，3 ，2。

2.    用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光模板稀释液，（最好用带芯枪头，下同）。

3.    在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL  的阳性对照(试剂盒提供) ，充分震荡 1 分钟， 得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

4.    换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL  的阳性对照(上步稀释所得) ，充分震 荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

5.    换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL  的阳性对照(上步稀释所得) ，充分震 荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

6.    重复上面的操作直到得到6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。 若无需制作标准曲线，将阳性对照稀释到 1×10E5 拷贝/μL 即可。

三、试剂配制(试剂准备区)

若有 N 个待检样品，准备 N+2 个 qPCR 管(N 个待检样品+1 个阴性对照+6 个阳性对 照) ，向各 qPCR 管中分别加入下列成分。

转移至样本准备区。

四、添加模板(模板添加区)

向 qPCR 管中分别加入 5 ul 模板，顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板、 食用淀粉植物源性成分 qPCR 阳性对照，离心 30 秒，立即进行扩增反应。