STR(Short Tandem Repeat,短串联重复序列)基因位点由长度为3-7个碱基对的短串连重复序列组成,这些重复序列广泛存在于人类基因组中,可作为高度多态性标记,被称为细胞的DNA指纹,其可通过PCR(聚合酶链式反应)来检测。
根据实际PCR扩增后检测到的片段长度和分型信息,会得到该细胞STR检测结果的峰图。一般而言,人源细胞或小鼠细胞STR图谱上,一个基因位点只会出现1个或2个峰,即纯合和杂合。一个基因位点出现3个及以上峰称为多等位基因,当结果中出现大于或等于3个多等位基因提示可能存在同源物种交叉污染;存在1-2个多等位基因可能源于细胞变异,不视为污染。但要注意也可能是三倍体等多倍体突变现象。
图1. 该人源细胞分型结果良好,无人源细胞交叉污染。其20个位点全部出单(纯合)或双峰(杂合)
STR位点信息
匹配度 | 鉴定结果 |
---|---|
≥80% | 为标准细胞系或为标准细胞系的衍生细胞系 |
55%-80% | 结合细胞系形态、细胞系特异性标记物等做辅助分析并进行综合判断 |
≤55% | 与其对应的标准细胞系不相关 |
这种方法主要通过对应位置出峰来判断是否为该种属。需要注意的是,10-18S位点必须出峰,若未出峰,则表明扩增失败。若细胞出现多峰,则表明该细胞存在交叉污染。
图2. 扩增结果显示为猪细胞,且无其他种属细胞交叉污染