病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒

点击次数:236次     发布时间:2024/7/12 9:16:23

 

病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒
产品及特点
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清、病毒原液、鼻咽拭子和无细胞体液中
提取高质量的病毒 DNA/RNA。独特的缓冲液/蛋白酶 K 体系能迅速裂解病毒,降解蛋白,
DNA/RNA 吸附于硅基质膜上,通过快速的漂洗、离心步骤,去除杂质,得到高纯度的病
DNA/RNA。本试剂盒具有高效、快速、方便之特点,所得病毒 DNA/RNA 不含蛋白、
核酸酶和其他杂质,可直接用于 PCRReal-Time qPCR、印迹等分子生物学实验。它具
有下列特点:
1. 简便快速:1 小时内可获得高纯度的病毒 DNA/RNA
2. 安全:无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂抽提,使用安全;
3. 稳定:所得病毒 DNA/RNA 纯度高,重复性好,方便下游应用。
成分规格
产品组成
GZ010702-50
GZ010702-100
GZ010702-200
Buffer GL
15 ml
25 ml
50 ml
Buffer RW1concentrate
13 ml
26 ml
52 ml
Buffer RW2concentrate
15 ml
30 ml
60 ml
Buffer REDNase/RNase-Free
10 ml
10 ml
30 ml
Proteinase K
1 ml
2 × 1 ml
4 × 1 ml
Spin Column with Collection Tubes
50
100
200
保存条件
蛋白酶 K -20℃,其他组分室温(15 - 25℃),可保存 12 个月。
自备试剂
无水乙醇。
(注意:使用前请先在缓冲液 Buffer RW1 Buffer RW2 中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的
标签)
1. 1.5 ml 离心管(自备),加入 20 μl Proteinase K 溶液。
2. 向离心管中加入 200 μl 血清、血浆、病毒拭子保存液或病毒原液、无细胞体液等,再
加入 200 μl Buffer GL,涡旋震荡充分混匀。
3. 56℃孵育 10 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
4. 加入 250 μl 无水乙醇,涡旋震荡 15 sec,室温放置 5 min,使溶液温度降至室温,短
暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
(注意:如果环境温度超过 25℃,无水乙醇应在冰上预冷后使用。)
5. 将一个吸附柱放入收集管中,将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中,12,000 rpm
30 sec,弃收集管中的滤液。
6. 向吸附柱内加入 500 μl Buffer RW1,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。
(注意:在 Buffer RW1 浓缩液中按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
7. 向吸附柱内加入 600 μl Buffer RW2,室温 10,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。
(注意: Buffer RW2 按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发;如需进一步提高核酸纯
度,可重复步骤 7 一次。)
8. 室温 12,000 rpm 离心 2 min,甩干残留液体。
(注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响基因组 DNA/RNA 的后续使用)
9. 将离心吸附柱置于一个干净的离心管中,小心打开吸附柱的盖子,室温放置 2 min
使吸附膜完全变干。
10. 加入 30 - 100 μl Buffer RE DEPC-H2O(自备),室温放置 2 min
1
2,000 rpm 离心 1 min
离心管底溶液即病毒 DNA/RNA
(注意:为增加洗脱效率,可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置 2 min,再次离心收集)
注意事项
样品避免反复冻融,否则会使蛋白变性或产生沉淀,导致提取的 DNA/RNA 片段小,提
取量下降。
Buffer GLBuffer RW1 结晶或产生沉淀,可在 56℃水浴溶解。
所有离心步骤均为室温下操作。
 

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