H u m a n   I m m u n o d e fi c i e n c y   V i r u s   I & II  D o u bl e  p r o b e RT - q P C R  K i t

产品及特点

人类免疫缺陷病毒（HIV）是一种逆转录病毒，能导致获得性免疫缺陷综合征（AIDS）， 这是一种严重的、致死性的传染病。 HIV 主要通过性接触、血液传播和母婴传播等方式传 播，感染后会使机体免疫功能受损，最终并发各种机会性感染和肿瘤。可分为 HIV1 和 HIV2。本试剂盒可在一次反应中快速检测两种病毒：HIV1 和 HIV2。根据探针法荧光定 量 RT-PCR 原理开发，它具有下列特点：

1.   即开即用，用户只需要提供核酸（含 DNA 和RNA）模板。

2.   提供两种病毒的阳性对照，便于区分假阴性样品。

3.   反应快速，灵敏度高。

4.   对所有单个病原体的高灵敏度和强特异性。

5.   可用于高通量检测。

6.   本试剂盒足够做 25μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 50 次，只能用于科研。

成分规格

保存条件

低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试 剂。

使用方法

一、核酸提取(样本制备区)

用自选方法提取纯化样品核酸，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。病 毒基因组 DNA/RNA 提取试剂盒（离心柱型）提取核酸。

二、稀释标准曲线样品(样本制备区)

（由于阳性对照浓度高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，避免污染样 品或本试剂盒的其他成分）。

1.    标记 6 个离心管，分别为 7 ，6 ，5 ，4 ，3 ，2。

2.    用带芯枪头分别加入 45 μL  荧光模板稀释液，（最好用带芯枪头，下同）。

3.    在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL  的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟， 得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

4.    换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL  的阳性对照(上步稀释所得)，充分震 荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

5.    换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL  的阳性对照(上步稀释所得)，充分震 荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

6.    重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。 若无需制作标准曲线，将阳性对照稀释到 1×10E5 拷贝/μL 即可。

三、试剂配制(试剂准备区)

若有 N 个待检样品，准备 N+2 个 qPCR 管(N 个待检样品+1个阴性对照+6 个阳性对 照) ，向各 PCR 管中分别加入下列成分。

转移至样本准备区。

四、添加模板(模板添加区)

向 qPCR 管中分别加入 2μl 模板，顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板、