红细胞渗透脆性检测试剂盒(比色法)

点击次数:672次     发布时间:2023/2/22 10:14:13

红细胞渗透脆性检测试剂盒(比色法)

  

产品简介:

红细胞(Red blood cell,RBC)也称红血球,是血液中数量最多的一种血细胞,脊椎动物体内通过RBC运送氧气,RBC同时还具有免疫功能,在贫血检查中可通过红细胞渗透脆性试验来检测红细胞膜的缺陷。

雅吉生物红细胞孵育渗透脆性检测试剂盒(比色法)(Erythrocyte Incubated OsmoticFragility Assay Kit)检测原理是将患者血液置于37℃孵育24h,使红细胞代谢继续进行,由于葡萄糖的消耗,储备的ATP减少,导致需要能量的红细胞膜对阳离子的主动传递受阻,造成钠离子在红细胞内聚集,细胞膨胀,孵育渗透脆性增加,某些有细胞膜缺陷以及某些酶缺陷的红细胞的葡萄糖和ATP很快被耗尽时,孵育渗透脆性明显增加,该实验被称为红细胞孵育渗透脆性试验,主要用于检测人、动物血液的红细胞孵育渗透脆性,并计算红细胞中性脆性(MCF)。 该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

 

产品组成:

名称

50T

Storage

试剂(A):NaCl Phosphate Buffer

100ml

4℃

试剂(B):ddH2O

100ml

RT

 

自备材料:

1、小试管

2、分光光度计

3、比色杯

 

操作步骤(仅供参考):

1、取肝素抗凝血2ml ,分成2份,1份立即实验,另1份密闭37C孵育24h后再作实验。

2、取小试管或恰当容器,依次编号,按照下表稀释成不同浓度。每次检查应设正常对照。

 

试管号

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

试剂A(ml)

3.4

3.0

2.8

2.6

2.4

2.2

2.0

1.8

1.6

1.4

1.2

0.8

0.4

试剂B(ml)

0.6

1

1.2

1.4

1.6

1.8

2.0

2.2

2.4

2.6

2.8

3.2

3.6

NACL浓度(g/L)

8.5

7.5

7.0

6.5

6.0

5.5

5.0

4.5

4.0

3.5

3.0

2.0

1.0

 

 

 

 

3、分别吸取40μl肝素抗凝血加入上述NaCI稀释液中轻轻混匀,室温(20°C)静置30min。

4、将各管再次混匀1次,离心沉淀5min,取上清液。

5、用分光光度计检测540nm波长,以NaCI Phosphate Buffer 作为空白管调零,测定

各溶血管的吸光度。

6、计算溶血百分率∶以1g/L NaCl完全溶血管的吸光度为100%,计算相应氯化钠浓度

的溶血百分率。溶血百分率(%)=各管吸光值/100%溶血管吸光值×100。

7、计算红细胞中性脆性(MCF)∶以溶血百分率为纵坐标,以氯化钠浓度为横坐标,作溶血

曲线图,即为红细胞盐水渗透脆性曲线。在曲线上,50%溶血的氯化钠浓度为红细胞中性脆性(MCF)。

 

参考区间︰

未孵育,50%溶血氯化钠浓度

4.00~4.45g/L

37℃孵育24H,50%溶血氯化钠浓度

4.46~5.9g/L

 

注意事项:

1、每次检查应设正常对照。

2、NaCl Phosphate Buffer pH值及温度必须恒定,pH改变0.1或温度改变5%,均可

使结果偏差0.01%。

3、NaCl Phosphate Buffer采用高纯度氯化钠配制,普通氯化钠不宜采用。

4、NaCl Phosphate Buffer不要被酸碱污染,同时注意密闭保存。

5、血液样品应直接滴入液体,不宜沿管壁流入。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期12个月有效,4℃保存。

 

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