注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

货号：YX-C-B613

规格：50T/24S

产品内容：

提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。

 β-葡萄糖苷酶（β-GC） 活性检测分光法试剂盒

可见分光光度法

试剂一：粉剂×2 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入 10mL 双蒸水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。

试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：液体 80mL×1 瓶，4℃保存。

标准品：液体 1mL×1 支，5μmol/mL 的对硝基苯酚溶液。

产品简介：

β-GC（EC 3.2.1.21）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化β-糖苷键水解，具有多方面生理作用：在纤维素的糖化作用中，β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖； β-GC 水解萜烯类香气前驱体，使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味；β-GC 能够水解植物体内野黑樱苷，释放 HCN，从而防止昆虫取食。

β-GC 分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在 400nm 有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GC 活性。

试验中所需的仪器和试剂：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样品的前处理：

a. 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 1000 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；15000g 4℃离心 20min，取上清，置冰上待测。

b. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.2g 组织，加入

1mL 提取液），进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心 20min，取上清，置冰上待测。

3、标准样品的准备：取 100μL 标准液，加入到 400μL 试剂三中，得到 1μmol/mL 标准液，十倍稀释到 100nmol/mL，用蒸馏水倍比稀释：50、25、12.5、6.25nmol/mL。100、50、25、12.5、6.25、0nmol/mL 做标准液。

二、测定步骤：

（1） 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 400nm，蒸馏水调零。

（2） 加样表

  β-葡萄糖苷酶（β-GC） 活性检测分光法试剂盒