注意:正式测定前请选择 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
货号: YX-C-B934
规格: 50T/48S
产品内容:
试剂一:粉剂×2 瓶,临用前每瓶加入 15mL 蒸馏水,用不完的试剂 4℃保存; 试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:乙醚,4℃保存(自备)。
重铬酸钾标准液:液体 10mL×1 瓶,重铬酸钾溶液(2.55mmol/L),相当于 0.1mg/mL 紫色没食子素溶液。
标准品稀释:
用 0.5mol/L HCL 溶液将标准液稀释至 0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0mg/mL。
产品说明:
S-PPO 主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质和色素,完成土壤芳香族化合物循环,用于土壤环境修复。
S-PPO 能够催化邻苯三酚产生紫色没食子素,后者在 430nm 有特征光吸收。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 比色皿、乙醚(不允许快递)、冰和蒸馏水。
操作步骤:
1、可见分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 430nm,试剂三调零。
2、标准曲线的建立:取 1mL 稀释好的标准液于比色皿中在 430nm 处测定吸光值 A,根据吸光度(x) 和浓度(y,mg/mL)做出标准曲线。
3、样本测定表
试剂名称 | 测定管 |
风干土样(g) | 0.05 |
试剂一(μL) | 500 |
振荡混匀,30℃恒温培养 1h | |
试剂二(μL) | 200 |
试剂三(μL) | 1750 |
振荡数次,室温静置 30min,取 1mL 上层液于 430nm 处测定吸光值 A。
S-PPO 活性计算:
根据标准曲线,将样品吸光值 A(x)带入公式中,计算出样品浓度 y(mg/mL)。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。
S-PPO ( U/g 土样) = y×V 提取相÷W÷T=840×yT : 反应时间,
1h=1/24d;V 提取相:1.75mL;W:样品质量,0.05g。