土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性检测试剂盒说明书

点击次数:625次     发布时间:2022/8/8 12:12:47

 注意:正式测定前请选择 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

货号: YX-C-B934

规格: 50T/48S

产品内容:

试剂一:粉剂×2 瓶,临用前每瓶加入 15mL 蒸馏水,用不完的试剂 4℃保存; 试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;

试剂三:乙醚,4℃保存(自备)

重铬酸钾标准液:液体 10mL×1 瓶,重铬酸钾溶液2.55mmol/L,相当于 0.1mg/mL 紫色没食子素溶液。

标准品稀释:

0.5mol/L HCL 溶液将标准液稀释至 0.10.050.0250.01250.006250.0031250mg/mL

产品说明:

S-PPO 主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质和色素,完成土壤芳香族化合物循环,用于土壤环境修复。

S-PPO 能够催化邻苯三酚产生紫色没食子素,后者在 430nm 有特征光吸收。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 比色皿、乙醚(不允许快递、冰和蒸馏水。

操作步骤:

1、可见分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 430nm,试剂三调零。

2、标准曲线的建立:取 1mL 稀释好的标准液于比色皿中在 430nm 处测定吸光值 A,根据吸光度x 和浓度(ymg/mL)做出标准曲线。

3、样本测定表

试剂名称

测定管

风干土样(g

0.05

试剂一(μL

500

振荡混匀,30℃恒温培养 1h

试剂二(μL

200

试剂三(μL

1750

振荡数次,室温静置 30min,取 1mL 上层液于 430nm 处测定吸光值 A


S-PPO 活性计算:

根据标准曲线,将样品吸光值 Ax)带入公式中,计算出样品浓度 ymg/mL)。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。

S-PPO  U/g 土样  y×V 提取÷W÷T=840×yT  时间

1h=1/24dV 提取相:1.75mLW:样品质量,0.05g

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