质粒使用和保藏方法
1简要介绍
本公司提供的质粒有三种类型:质粒、甘油菌和穿刺菌。客户可以根据自己的喜好自由选择其中一种。质粒形式:冰袋运输。长期保存条件-20度。储存时间长,可达到5年之久。需要转化感受态细胞扩增质粒。甘油菌形式:常温运输。长期保存条件-80度。-80度条件下可以保存5年之久。可直接培育繁殖抽提质粒。穿刺菌:常温运输,可用顺丰航空快递,到货时间快。保存条件为4-10度。保存时间6个月。可直接培育繁殖抽提质粒。
2使用方法
质粒形式使用方法:
(1)制备转化感受态细胞;(2)热击法转化感受态细胞;(3)挑取单克隆,培养单克隆并抽提质粒。
甘油菌使用方法:
(1)配置LB培养基,LB液体培养基配方:胰蛋白胨(Tryptone)10g/L酵母提取物(Yeastextract)5g/L氯化钠(NaCl)10g/LpH7.4,灭菌后,加入相应的抗生素;
(2)接种100ul至1-3ml的含抗生素的培养基中,37度,220rpm培养18小时以上;
(3)使用质粒抽提试剂盒抽提质粒。
穿刺菌使用方法:
(1)配置LB培养基,LB液体培养基配方:胰蛋白胨(Tryptone)10g/L酵母提取物(Yeastextract)5g/L氯化钠(NaCl)10g/LpH7.4,灭菌后,加入相应的抗生素;
(2)接种100ul至1-3ml的含抗生素的培养基中,37度,220rpm培养18小时以上;
(3)使用质粒抽提试剂盒抽提质粒。
3菌种保藏方法:
注意要做好含质粒的菌种保藏工作,保存方法为甘油菌形式,-80度保藏。