一、产品信息
产品形式 | 运输方式 | 保存温度 | 保存期限 |
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★质粒干粉 | 常温 | -20度 | 90天 |
菌落平板 | 冰袋 | 4度 | 7天 |
穿刺菌 | 冰袋 | 4度 | 7天 |
甘油菌 | 冰袋 | -80度 | 90天 |
液体质粒 | 冰袋 | -20度 | 90天 |
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(请务必转化挑单克隆重提后使用)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl 无菌水溶解质粒;
②取2μl质粒加至100μl 感受态中,冰浴30min后,42℃热激90s,再冰浴2min;
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀,并全涂至对应抗性LB平板上;
⑤将平板正向培养1h,再倒置培养14-16h。如果是30度培养则培养20h;
(如果第二天菌落过多,请将质粒稀释后再转化。如果第二天无菌落,请加入10μl质粒转化)
2、甘油菌:四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏。
3、穿刺菌:穿刺接种后四区划线,挑单菌落培养。
4、平板:直接挑单菌落液体培养。
5、液体质粒:单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
三、转化图片
