神经元细胞收货后处理步骤

点击次数:825次     发布时间:2020/9/25 14:00:20

 神经元细胞属于终末分化细胞,细胞本身体外不增殖;但是在合适培养条件下,神经元突触会生长。

神经元细胞本身贴壁不牢易脱落,细胞贴壁需用PLL多聚赖氨酸包被处理培养瓶或培养器皿。

由于细胞贴壁不牢,运输会导致细胞收缩、脱落、团等状况。

1、 细胞收缩收货后观察状态,收缩脱落,更换培养液,继续培养,3换液一次,等5-7可见细胞突触生长:细胞培养液必须37预热冷培养会导致细胞收缩脱落

2、 脱落、聚团:收集细胞离心细胞沉淀,沉淀0.25%胰酶消化2-3min后,终止消化,PBS离心洗涤,重新接种,接种使用包被器皿,最直接接种于实验器皿,贴壁之后正常换液培养实验如果细胞不贴壁可适当添加5%FBS,促进贴壁,持续加血清培养,会增加杂细胞,请避免再次消化

3、 :胰酶消化会损伤细胞,避免多次消化暴力机械吹打会损失细胞,请轻柔操作;神经元本身不增殖,长时间培养部分杂细胞会增殖变多,此类杂细胞本身更利于支撑神经元细胞生长,如果刻意在乎细胞纯度请勿长时间培养。

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