发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

点击次数:29次     发布时间:2025/6/30 8:57:33

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产品简介

本试剂盒基于探针法荧光定量RT-PCR技术,专为检测发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)设计。SFTSV是一种RNA病毒,感染后临床表现为急性发热、血小板减少、白细胞减少、肝肾功能损害等,严重者可危及生命。本试剂盒具有高灵敏度、高特异性和操作简便等特点,适用于科研领域的SFTSV检测。


产品特点

  1. 即开即用:用户仅需提供样品RNA模板即可完成检测。

  2. 高灵敏度:优化的引物和探针设计,检测下限低至1×10²拷贝/μL。

  3. 高特异性:针对SFTSV RNA高度保守区设计,无交叉反应。

  4. 双重功能:支持定性和定量检测,定量线性范围达5个数量级(1×10²~1×10⁷拷贝/μL)。

  5. 内控设计:提供阳性对照,有效区分假阴性结果。

  6. 高效稳定:50次反应体系,-20℃保存有效期12个月。


试剂盒组成

组分名称 货号 规格
2×OneStep Probe Mix 21101a 550 μL
OneStep Probe Enzyme Mix 21102b 110 μL
DEPC-H₂O 70401 1 mL
荧光模板稀释液 70407 1 mL
SFTSV RT-qPCR引物-探针混合液 15-66700yp 160 μL
SFTSV RT-qPCR阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) 15-66700pc 50 μL

保存与运输

  • 保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。

  • 运输条件:低温运输(冰袋或干冰)。

  • 注意事项:阳性对照需单独存放,避免污染其他组分。


操作步骤

一、RNA提取(样本制备区)

推荐使用配套的病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒(货号:GZ010702-50)提取RNA,也可使用其他兼容的提取方法。

二、标准曲线制备(样本制备区)

  1. 标记6支离心管为2~7号,每管加入45 μL荧光模板稀释液。

  2. 依次梯度稀释阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),获得1×10²~1×10⁷拷贝/μL的标准品。

三、反应体系配制(试剂准备区)

每20 μL反应体系包含:

  • 2×OneStep Probe Mix:10 μL

  • OneStep Probe Enzyme Mix:2 μL

  • 引物-探针混合液:3 μL

  • 模板RNA:5 μL

四、qPCR扩增(扩增区)

步骤 温度 时间 循环数
逆转录 50℃ 20 min 1
预变性 95℃ 10 min 1
qPCR扩增 95℃ 15 sec 45
  60℃ 60 sec  

检测通道:FAM荧光通道。

五、结果判读

  1. 定量分析:以标准曲线计算样品浓度。

  2. 定性分析

    • 阳性:Ct值<38,且呈S型扩增曲线。

    • 可疑:Ct值38~40,需复检确认。

    • 阴性:Ct值>40或无扩增。


注意事项

  1. 实验分区操作,避免交叉污染。

  2. 使用带滤芯枪头,每步更换枪头。

  3. 本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。


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货号 产品名称
GZ010702-50 病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒
GZ020701-1 2×Probe qPCR Mix
GZ020801-1 2×SYBR qPCR Mix

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