一、细胞基本信息
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 细胞名称 | 大鼠少突胶质前体细胞系CG4 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 推荐培养基 | DMEM（高糖） + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素 |
| 培养环境 | 37℃, 5% CO₂, 95%空气湿度 |
| 冻存条件 | 无血清冻存液（推荐货号：C7001） |
| 传代比例 | 1:2至1:3（根据细胞密度调整） |
| 供应商信息 | 上海雅吉生物科技有限公司（Shanghai Yaji Biotechnology Co., Ltd） |
二、细胞复苏与接种
1. 冻存管复苏步骤
① 快速解冻：将冻存管置于37℃水浴中，轻柔摇晃至完全融化（≤1分钟）。
② 离心洗涤：转移细胞悬液至含5mL完全培养基的离心管，1000rpm离心5分钟。
③ 重悬接种：弃上清，用新鲜培养基轻柔重悬，接种至T25培养瓶或6cm培养皿。
④ 初始观察：24小时后更换培养基，显微镜下评估细胞贴壁率（≥80%为正常）。
2. 注意事项
-
全程无菌操作，避免反复冻融。
-
若运输中细胞脱落，收集培养基离心后重新接种（详见"问题处理"部分）。
三、细胞传代流程
1. 消化步骤
① 弃旧液：吸除培养上清，用预温PBS轻柔洗涤1次。
② 胰酶消化：加入1mL 0.25%胰酶-EDTA（覆盖瓶底），37℃消化1-2分钟。
③ 终止消化：当80%细胞变圆时，立即加入2倍体积完全培养基终止反应。
2. 细胞收集与分瓶
① 离心：1000rpm离心5分钟，弃上清。
② 重悬分装：按1:2比例分至新培养瓶（T25瓶建议终体积5-6mL）。
关键提示：
-
消化过度易损伤细胞，建议显微镜下实时监控。
-
传代后24小时内避免频繁移动培养瓶。
四、细胞冻存方案
1. 冻存步骤
① 细胞准备：取对数生长期细胞（密度80%-90%），按传代方法收集。
② 冻存液配置：使用无血清冻存液（C7001），调整细胞密度至5×10⁶/mL。
③ 梯度冻存：
-
4℃静置10分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
2. 质量控制
-
冻存前需检测细胞活力（台盼蓝染色≥90%）。
-
每批次保留1管备用，复苏验证后再弃原代细胞。
五、常见问题处理
| 问题现象 | 可能原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| 细胞贴壁不良 | 运输震动/消化过度 | 离心收集细胞，更换新包被培养瓶 |
| 增殖缓慢 | 血清批次差异/污染 | 检测FBS活性，排除支原体污染 |
| 黑点悬浮物 | 细胞碎片或污染 | 增加PBS洗涤次数，抗生素处理 |
六、售后服务条款
1. 质量承诺
-
提供到货后72小时内细胞状态清晰照片（40X-200X多视野）。
-
经确认的污染或存活率<80%可申请重发（需提供完整操作记录）。
2. 免责声明
-
因以下情况导致的问题不在售后范围：
✓ 使用非推荐培养基体系
✓ 操作污染或传代比例不当
✓ 未按规范进行冻存/复苏
七、论文引用格式
中文文献：
"大鼠少突胶质前体细胞CG4（货号:XXX）由上海雅吉生物科技有限公司提供。"
英文文献：
"The CG4 rat oligodendrocyte precursor cell line (Cat.No.XXX) was provided by Shanghai Yaji Biotechnology Co., Ltd."
备注：本说明书基于标准操作流程编制，具体实验条件需根据实际研究需求优化。建议首次使用前联系技术支持获取个性化指导。
